Проверка влияния физраствора (0,9%-ого раствора NaCl)
на градуировочную зависимость
Чтобы проверить влияние физраствора на градуировочную зависимость, необходимо внести в раствор А насыщенный раствор NaCl.
Насыщенный раствор NaCl готовили, растворяя порошок NaCl в 50 мл воды (вода бидистиллированная) при нагревании до того момента, пока не прекратится растворение.
В колбу объемом 100 мл вносили 5 мл приготовленного насыщенного раствора NaCl, 1 мл раствора А, затем добавляли 10 мл 1 М HCl и доводили до метки бидистиллированной водой.
Растворы для фотометрирования готовили сериями. В мерные колбы объемом 50 мл вносили разные по объему аликвоты раствора А с физраствором. После этого растворы доводились до метки 0,1 М хлористоводородной кислотой, тщательно перемешивались и фотометрировались относительно раствора сравнения (0,1 М хлористоводородная кислота) при длине волны 277 нм.
Определение сорбции и десорбции ципрофлоксацина мягкими контактными линзами проводили с использованием спектрофотометрической методики.
Исследование обменных свойств мягких контактных линз проводили по схеме:
1) измерение массы линз в сухом и набухшем состоянии (табл. 3.1);
2) определение концентрации ципрофлоксацина в исходном растворе капель;
3) насыщение мягких контактных линз препаратом при различном времени сорбции и определение концентрации ципрофлоксацина в растворе после насыщения;
4) вытяжка ципрофлоксацина из мягких контактных линз в воду или физраствор и определение его концентрации в вытяжках;
5) расчет массы поглощенного ципрофлоксацина по разности его масс в исходном растворе капель и в растворах после вымачивания линз;
6) расчет сорбции и десорбции ципрофлоксацина мягкими контактными линзами.
Методика определения массы МКЛ
Сухие МКЛ поочередно взвешивают на аналитических весах. Набухшие линзы хорошо встряхивают, а затем взвешивают на полиэтиленовой подложке не менее 5 раз каждую. Данные представлены в таблице 3.1.
Таблица 3.1.
Массы МКЛ из материала «Кемерон-1»
№ линзы
mлинзы (безводный полимер), г
mлинзы (гидратированный полимер), г
1
0,1062
0,30340,0002
2
0,31790,0002
3
0,1060
0,31740,0054
4
0,1082
0,31590,0003
5
0,1058
0,31000,0014
6
0,1064
0,31670,0005
7
0,31340,0006
8
0,1076
0,32390,0002
9
0,1054
0,30310,0005
10
0,1057
0,30310,0006
Методика определения содержания ципрофлоксацина в исходном препарате
Определение проводилось по методике 3.4.1, описанной ранее.
Перед тем как залить линзы раствором ципрофлоксацина, проводилось определение его содержания в исходном растворе капель.
1 мл испытуемого раствора вносили в стандартную мерную колбу объемом 50 мл, разбавляли до полного объема 0,1 М хлористоводородной кислотой (раствор А). Затем 2 мл полученного раствора переносили в мерную колбу объемом 50 мл и доводили до метки 0,1 М хлористоводородной кислотой (раствор В). Снимали показания поглощения в ячейке l = 1 см при длине волны 277 нм против 0,1 М HCl в качестве раствора сравнения.
Массу ципрофлоксацина mисх находили по формуле (3.1).
Методика проведения сорбции ципрофлоксацина линзами из материала «Кемерон»
Чтобы посмотреть динамику сорбции ципрофлоксацина, каждая линза отдельно замачивалась в фиксированном объеме капель (2 мл) на определенное время. По истечении этого времени линза извлекалась из раствора.
Анализ раствора после сорбции проводился следующим образом: 1 мл испытуемого раствора вносили в стандартную мерную колбу объемом 50 мл, разбавляли до полного объема 0,1 М хлористоводородной кислотой (раствор А). Затем 2 мл полученного раствора переносили в мерную колбу объемом 50 мл и доводили до метки 0,1 М хлористоводородной кислотой (раствор В). Снимали показания поглощения в ячейке l = 1 см при длине волны 277 нм против 0,1 М HCl в качестве раствора сравнения.
Массу сорбированного ципрофлоксацина (mпогл) находили по разности масс в исходном растворе капель (mисх) и после сорбции (mп/погл).
Массу после сорбции m п/погл находили по формуле (3.1).
mпогл = mисх - mп/погл
Степень сорбции определяется как отношение массы поглощенного ципрофлоксацина (mпогл) к массе сухой линзы, а степень извлечения как отношение массы поглощенного ципрофлоксацина (mпогл) к mисх.
Методика проведения изучения десорбции ципрофлоксацина линзами из материала «Кемерон»
Десорбцию ципрофлоксацина проводили следующим образом: после вымачивания линз в каплях их извлекали из фиксированного объема раствора ципрофлоксацина и помещали в такое же фиксированное по объему количество бидистиллированной воды или физраствора (2 мл). Перед тем как поместить линзу в первый фиксированный объем воды, ее хорошо встряхивали, споласкивали в 2 мл воды, чтобы проанализировать так называемый смыв. Анализ полученного раствора после смыва проводили следующим образом: 1 мл испытуемого раствора вносили в стандартную мерную колбу объемом 50 мл, добавляли 5 мл 1 М хлористоводородной кислоты и доводили до метки бидистиллированной водой. Снимали показания поглощения в ячейке l = 1 см при длине волны 277 нм по отношению к 0,1 М HCl в качестве раствора сравнения.
Через определенные промежутки времени (30 мин) извлекали линзу из первой склянки с водой или физраствором и помещали в следующую склянку с таким же объемом. Для сравнения проводили десорбцию в общий объем воды или физраствора при соответствующем времени выдержки. Опыты повторялись несколько раз.
Анализ полученного раствора после вымачивания линз в воде (физрастворе) проводили следующим образом: 1 мл испытуемого раствора вносили в стандартную мерную колбу объемом 50 мл, добавляли 5 мл 1 М хлористоводородной кислоты и доводили до метки бидистиллированной водой. Снимали показания поглощения в ячейке l = 1 см при длине волны 277 нм против 0,1 М HCl в качестве раствора сравнения.
Массу десорбированного ципрофлоксацина mвозв вычисляли по формуле (3.1).
Методика модифицирования МКЛ
Модификацию линз проводили нагреванием их в 2%-ом растворе NaOH при 950С в течение 2 часов. Раствор NaOH готовили из точной навески массой 2,000 г порошка NaOH, растворяя ее в колбе объемом 100 мл водой (вода бидистиллированная). Затем полученный раствор переносили в пластмассовую склянку [2].
А затем изучали сорбцию и десорбцию ципрофлоксацина линзами из материала «Кемерон» по имеющимся методикам.
Для решения поставленных в работе задач по изучению сорбции - десорбции ципрофлоксацина МКЛ из материала «Кемерон-1» выбрана чувствительная спектрофотометрическая методика [13,14], использующаяся для контроля его содержания в таблетках и каплях. При этом определение ведется по собственному поглощению вещества в солянокислом растворе (разд. 3.4.1).
4.1 УФ - спектр ципрофлоксацина
Согласно литературным данным [12] максимум поглощения в спектре солянокислых растворов приходится на 276-278 нм, что согласуется с полученными данными (рис. 4.1).
Рис. 4.1. Вид УФ-спектра ципрофлоксацина с концентрацией 5 мкг/мл в 0,1 М растворе HCl.
Вид спектра и положение максимума зависит от рН среды из-за присутствия карбоксильной группы и обусловлен сложной сопряженной структурой молекулы, приводящей к формированию нескольких максимумов поглощения. Необходимость растворения в кислоте связана с протонированием вторичного атома азота, что приводит к увеличению растворимости по сравнению с растворимостью в воде. Поэтому при проведении всех исследований в растворе создавалась постоянная концентрация HCl - 0,1 моль/л. Величина экспериментального молярного коэффициента поглощения для раствора ципрофлоксацина в глазных каплях «Ципромед» составляет 43500 ± 400 М-1см-1 (разд. 4.2), что близко к 44800, приведенному в работе [12]. Кроме того, форма основной полосы поглощения и плеча в длинноволновой области не зависят от производителя капель. Наличие компонентов минимально в составе глазных капель «Ципромед» (указано присутствие 0,022% бензалкония хлорида при содержании ципрофлоксацина 0,3 %).
4.2 Характеристики градуировочной зависимости для определения ципрофлоксацина
В выбранных условиях была получена градуировочная зависимость оптической плотности солянокислого раствора ципрофлоксацина при 277 нм от его концентрации. Получилась линейная градуировочная зависимость в диапазоне концентраций ципрофлоксацина от 9,00*10-7 моль/л до 2,17*10-5 моль/л (0,3 мкг/мл до 7,2 мкг/мл), проходящая через начало координат. Полученные данные представлены на рисунке 4.2 и в таблице 4.1.
Рис. 4.2. Градуировочная зависимость оптической плотности раствора при 277 нм от концентрации ципрофлоксацина
Характеристики градуировочной зависимости для разных способов выражения концентрации (коэффициент a – незначим):
b = 43500;
S2yx = 2,12*10-5; S2b = 26030;
S2a = 2,96*10-6;
y = (43500 400)x;
ymin = 0,005;
xmin = Cmin = 1,99*10-7 моль/л.
b = 0,131;
S2yx = 1,69*10-5; S2b = 1,88*10-7;
S2a = 2,35*10-6;
y = (0,131 0,001)x;
xmin = Cmin = 0,059 мкг/мл.
Страницы: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10
