Рефераты. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на нейтрофилы и факторы мукозального иммунитета

Примечание: *-достоверность различий показателей по отношению к неактивированным нейтрофилам, **-достоверность различий показателей по отношению к НГ, облучённых лазером с постоянной генерацией импульса, ***- достоверность различий показателей по отношению к НГ, облучённых лазером с переменной генерацией импульса С учетом поправки Бонферрони критический уровень р составил 0,003. U-критерий Мана- Уитни.

 

Анализ цитокинового состава показал достоверно более высокое содержание провоспалительных цитокинов ИЛ-1α, ИЛ-1β, РАИЛ1, ИЛ-8, ФНО-α в супернатантах нейтрофилов крови доноров, облучённых лазером с переменной генерацией импульса (таблица 4). Возможно, данный вид излучений является стимулирующим фактором, приводящим к достоверно, по сравнению с неактивированными и активированными НИЛИ с постоянной генерацией импульса НГ доноров более выраженной секреции преформированных цитокинов. Помимо этого, в секреторных продуктах нейтрофилов были обнаружены высокомолекулярные пептиды, обладающие иммунотропной активностью-дефенсины и бактерицидный/индуцированный протеин BPI (таблица 5).


Таблица 5

Содержание дефенсинов и белка BPI в супернатантах нейтрофилов неактивированных и активированных лазерным излучением с постоянной и переменной генерацией импульса (М±m)

Пептидные продукты нейтрофилов

Супернатанты

неактивированных

нейтрофилов


Параметры излучения

Супернатанты

нейтрофилов

активированные

ЛО с постоянной

генерацией

импульса

Супернатанты

нейтрофилов

активированных

ЛО с переменной

генерацией

импульса

Дефенсины, пг/мл

4.47±0.95

4.78±0.59

*, ***

6.47±0.45

*,**

BPI, пг/мл

0.67±0.20


0.75±0.22

*, ***


0.99±0.33

*,**


Примечание: *-достоверность различий показателей по отношению к неактивированным нейтрофилам, **-достоверность различий показателей по отношению к НГ, облучённых лазером с постоянной генерацией импульса, ***- достоверность различий показателей по отношению к НГ, облучённых лазером с переменной генерацией импульса С учетом поправки Бонферрони критический уровень р составил 0,003. U-критерий Мана- Уитни.


Результаты исследования биохимического состава секреторных продуктов неактивированных и стимулированных лазерным излучением нейтрофилов показали следующее (таблица 6). Продукты метаболизма оксида азота (NO) присутствовали как в супернатантах нейтрофилов интактных, так активированных ЛО НГ. Содержание метаболитов азота в супернатантах облучённых лазером нейтрофилов увеличилось в 3,7 раза по сравнению с содержанием продуктов метаболизма оксида азота с супернатантах интактных НГ. Более чем на 50% увеличилось содержание нитратов и нитритов в секреторных продуктах нейтрофилов, облучённых лазером низкой интенсивности.


Таблица 6

Биохимический состав в супернатантах нейтрофилов неактивированных и активированных лазерным излучением с постоянной и переменной генерацией импульса

 Компоненты

Супернатанты

неактивированных

нейтрофилов

Параметры излучения

Супернатанты

нейтрофилов

активированные

ЛО с постоянной

генерацией импульса

Супернатанты

нейтрофилов

активированных

ЛО с переменной

генерацией импульса

Нитраты, мкмоль/л

15.21±3.43

31.11±7,23

*, ***

39.19±7,26

*,**

Нитриты, мкмоль/л

43.1±5.17

82.38±22,83

*, ***

99.38±22.11

*,**

Общее содержание метаболитов оксида азота, мкмоль/л

28.31±8.35

137.91±35,24

*, ***

166.9±34.29

*,**

Са2+ моль/л

0.22±0.01

0.52±0.02

*, ***

0.70±0.04

*,**

Мg, 2+ моль/л

0.98±0.02

0.58±0,04

*, ***

0.48±0.03

*,**

Общее содержание глюкозы мкмоль/л

4.95±0,05

3.25±0.05

*, ***

2.01±0.02

*,**


Примечание: *-достоверность различий показателей по отношению к неактивированным нейтрофилам, **-достоверность различий показателей по отношению к НГ, облучённых лазером с постоянной генерацией импульса, ***- достоверность различий показателей по отношению к НГ, облучённых лазером с переменной генерацией импульса С учетом поправки Бонферрони критический уровень р составил 0,003. U-критерий Мана- Уитни.


Возможно, повышение содержания NO при воздействии НИЛИ происходит за счёт усиления окислительно-восстановительных процессов, в том числе ускорения реакции окисления аргинина ферментом NO-синтазой, результатом которой и является образование оксида азота (Артюхов В.Г., 2005). Выделяющийся в межклеточное пространство NO является реакционно-способным соединением с широким спектром биологического, в том числе, бактерицидного действия (Захарова М.А., 2003).

При изучении содержания глюкозы в супернатантах неактивированных и активированных нейтрофилов доноров было отмечено, что в ответ на стимуляцию гранулоцитов лазером низкой интенсивности уровень глюкозы достоверно снижается (р<0,003, р=0,00023) с 4,95 до 2,01 мкмоль/л, возможно, такой расход глюкозы, являющейся ключевым метаболитом биохимических процессов возможен вследствие повышения энергетических затрат клетки при её стимуляции лазерным излучением (Бережная Н.М., 1998; Маянский А.Н. и соавт., 1989).

Активация нейтрофилов лазером низкой интенсивности с постоянной генерацией импульса выявила рост уровня секреции ионов Са2+, в супернатантах нейтрофилов более чем в 3 раза по сравнению с неактивированными нейтрофилами доноров. Возможной причиной увеличения концентрации ионов Са2+, после стимуляции НГ лазерным излучением является быстрый выход из органел- кальциосом в цитозоль большого количества ионов Са2+, в результате чего мы наблюдаем рост в супернатантах ионов кальция (Glossman H., 1999). Зарегистрированное снижение концентрации ионов Мg2+ возможно, происходят в результате его расходования на процессы активации процессов метаболизма, а именно катаболизма в клетке (Эллиот В., 2000). Сравнительный анализ биохимического, цитокинового состава супернатантов нейтрофилов облучённых лазерным излучением с постоянной и переменной генерацией импульса показал, что, несмотря на различный количественный состав секреторных продуктов, полученных в результате активации клетки лазерным излучением с постоянной и переменной генерацией импульса, данные изменения имели однонаправленный характер.

Наиболее значимые изменения показателей зарегистрированы при воздействии лазером с переменной генерацией импульса. Полученные нами данные о составе супернатантов нестимулированных и стимулированных нейтрофилов, в целом, совпадают с результатами исследования А.В. Чукичева (1996), И.Е.Третьяковой (2003). Зарегистрированное нами усиление функциональных возможностей нейтрофилов и продуктов их секреции с учётом биоэффективных доз воздействия лазерным излучением низкой интенсивности послужило основанием для проведения объективного исследования иммунотропных эффектов воздействий лазерного излучения низкой интенсивности в практике.

Этап исследования иммунотропных эффектов лазеров низкой интенсивности in vivo

На современном этапе возможны 2 пути реализации эффектов действия лазеров низкой интенсивности: эффекты, обусловленные их локальным и системным применением в терапевтических целях. Исходя из возможностей применения лазеров красного спектра излучения в терапевтической практике, представляло огромный интерес изучение их возможностей для устранения иммунологических дисфункций. В связи с вышеизложенными обстоятельствами, следующим этапом наших исследований стало изучение влияния лазерного излучения на клеточные и гуморальные факторы системного иммунитета, состояние нитроксидергической системы, липидного профиля периферической крови при проведении внутрисосудистого лазерного облучения крови (ВЛОК) у женщин с хламидийной инфекцией нижнего отдела репродуктивного тракта.

У пациенток с воспалительными заболеваниями нижнего отдела репродуктивного тракта, вызванными хламидиями были выявлены сдвиги во всех изучаемых звеньях иммунной системы, характерные для хронического воспалительного процесса: лейкоцитоз, нейтрофилия с уменьшением абсолютного количества нейтрофилов, лимфоцитоз с изменением субпопуляционного состава, выраженном в снижении процента лейкоцитов, несущих CD3, СD 4, СD 16; СD 20 рецепторы, повышении CD8+лимфоцитов, снижения СD 95+клеток, иммнорегуляторного индекса (СD 4+/CD8+), активности нейтрофилов по НСТ-тесту угнетения фагоцитарной функции и функционального резерва нейтрофилов, усилении лизосомальной активности, повышении концентрации Ig A, Ig М, Ig G в сыворотке крови, снижения уровня циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), содержания С1-С3 компонентов комплемента, СН 50, уровня ИЛ-1α, ИЛ-1β, ФНО-α, ИФН-γ, дефенсинов, бактерицидного протеина BPI, при повышении концентрации ИЛ-8. В соответствии с рекомендациями лечению урогенитального хламидиоза внутрисосудистое лазерное облучение крови (ВЛОК) может быть использовано в комплексе лечебных мероприятий.

Нами проведена оценка эффективности использования ВЛОК для коррекции выявленных иммунологических дисфункций. Исследование иммунологических показателей крови проведено до начала терапии и на следующий день после её завершения базисной терапии. Контрольную группу составили здоровые женщины без хламидийной инфекции нижнего отдела репродуктивного тракта (таблица 7).


Таблица 7

Иммунологические показатели периферической крови у женщин с хламидийной инфекцией нижнего отдела репродуктивного тракта до и после терапии с применением ВЛОК

Показатели

Здоровые

женщины

До

лечения

Женщины с хламидийной инфекцией нижнего отдела репродуктивного тракта


Базисная

терапия

Базисная

терапия+ ВЛОК

Количество лейкоцитов,×109/ л


5.59 ± 0.10

9.01 ± 0.30

*

8.91 ± 0,22

*,****

6.01 ± 0.12

*,***

Количество лимфоцитов,%


29.21 ± 1.02

35.61 ± 1,10

*

38.51 ± 1,02

*,****

39.51 ± 1,07

**,***

Количество лимфоцитов,×109/л

1.94 ± 0,12

2,13 ± 0,16

*

2.19 ± 0,12

*,****

1.98 ± 0,12

**,***

Количество нейтрофилов,%

68.90 ± 1,13

52.90 ± 1.11

*

61.90 ± 1.12

*,****

69.90 ± 1.09

**,***

Количество нейтрофилов,×109/л

3.78 ± 0,25

2,26 ± 0,15

*

3.44 ± 0.25

*,****

3.84 ± 0,25

**,***

Лизосомальная активность нейтрофилов, %

91.55 ± 1,12

97.52 ± 1.10

*

95.52 ± 1.16

*,****

92.50 ± 1.14

**,***

Лизосомальная активность нейтрофилов, у.е.

324.0 ±15,01

349.05 ±19,10

*

371.10 ±16,03

*,**,****

321.09 ± 15,01

**,***

НСТ–тест спонтанный, %

46.91 ± 1.72

37.9 ± 1.94

*

42.9 ± 1.23

*,****

47.91± 1.72

**,***

НСТ–тест спонтанный, у.е.

0.58 ± 0.05

0.50 ± 0,03

*

0.54 ± 0,02

*,****

0.59 ± 0.05

**,***

НСТ–тест активированный, %

57.44 ± 1.23

50.41 ± 1.77

*

53.41 ± 1,75

*,****

58.44 ± 1.22

**,***

НСТ–тест активированный, у.е.

0.83 ± 0.04

0.68 ± 0.03

*

0.78 ± 0.02

*,****

0.88 ± 0.04

**,***

ФРН

1.94± 0.46

1.70 ± 0,41

*

1.86 ± 0,42

*,****

1.98± 0.46

**,***

Активность фагоцитоза нейтрофилов, %

46.51 ± 1.24

35.51 ± 1.22

*

42,51 ± 1,26

*,**,****

47.51 ± 1,20

**,***

Интенсивность фагоцитоза нейтрофилов, у.е.

1.72± 0,06

1.52 ± 0,08

*

1.62 ± 0,07

*,****

1.84± 0,06

**,***

СD3, %

27.92 ± 1,94

18.12 ± 1.94

*

24.12 ± 1.94

*,****

28.12 ± 1.94

**,***

СD3, абс.

0.50 ± 0,08

0.45 ± 0.08

*

0,42 ± 0,01

*,****

0,53 ± 0.08

**,***

СD4, %

30.81 ± 1,22

21.89 ± 1.73

*

29,19 ± 1,13

*,**,****

31,81 ± 1.22

**,***

СD4, абс.

0.45 ± 0,02

0.37 ± 0,06

*

0.43 ± 0,06

*,****

0,47 ± 0,02

**,***

СD8, %

21.14 ± 1,16

24.14 ± 1,23

*

21.14 ± 1,20

*,****

22,14 ± 1,16

**,***

СD8, абс.

0.41 ± 0,02

0,44 ± 0,05

*

0.42 ± 0,01

*,****

0,41 ± 0,02

**,***

СD4/СD8

1,95 ± 0,06

0.97 ± 0,06

*

1.19 ± 0,08

*,****

1,97 ± 0,06

*,***

СD16, %

13.68 ± 0,27

12.03 ± 0,70

*

13.63 ± 0,17

*,****

13,88 ± 0,27

**,***

СD16, абс.

0.21 ± 0,05

0,22 ± 0,03

*

0.24 ± 0,01

*,****

0,23 ± 0,05

**,***

СD20, %

13,86 ± 0,88

10.61 ± 0,79

*

11,81 ± 0,99

*,****

13.92 ± 0.88

**,***

СD20, абс.

0.22 ± 0,03

0,19 ± 0,03

*

0,21 ± 0,23

*,****

0.22 ± 0.03

**,***

СD95, %

21.69 ± 1,98

14,69 ± 2,10

*

17.69 ± 2,16

*,**,****

22,69 ± 1.98

**,***

СD95, абс.

0.34 ± 0,06

0,28 ± 0,06

*

0.33 ± 0,06

*,****

0.35 ± 0.06

*,***

С1, эф.мол /мл

99.93±6.01

91.2±8.01

*

90.2±7.01

*,****

100.21±6.06

**,***

С2, эф.мол /мл

84.40±4.46

83.99±4.53

*

83.21±4.50

*,****

84.42±4.42

**,***

С3, эф.мол /мл

96.81±3.12

88.8±3.62

*

82.11±2.41

*,****

96.8±3.12

**,***

С4, эф.мол /мл

80.21±3.34

78.2±3.81

*

72.22±3.54

*,****

80.2±3.34

**,***

С5, эф.мол /мл

88.52±4.25

87.5±3.11

*

86.52±2.6

*,****

88.5±4.25

**,***

СН-50, у.е.

63.22±6.15

69.22±6.62

*

56.22±7.61

*,****

63±6.15

**,***

ЦИК

69.44±9.46

39±8.44

*

49.13±8.03

*,****

69±9.46

**,***

Ig А, г/л

2.32 ± 0,12

2.80 ± 0,09

*

2.49 ± 0.10

*,****

2,92 ± 0,12

**,***

Ig М, г/л

1.19 ± 0.14

1.23 ± 0,08

*

1.10 ± 0.11

*,****

1,19 ± 0.14

**,***

Ig G, г/л

9.16 ± 0.29

9.51 ± 0,38

*

9.36 ± 0.25

*,****

9,16 ± 0.29

**,***

Страницы: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9



2012 © Все права защищены
При использовании материалов активная ссылка на источник обязательна.