Окраска по Романовскому: мазки складываем на мостик над лотком или в карзинку, фиксируем 1 - 2 мин., покрываем краской на 20 - 45 мин., промываем под струёй водой 1 - 2 мин., просушиваем. С иммерсионным маслом считаем мазки в метёлочке мазка под микроскопом – лейкоцитарную формулу до 100 клеток.
КДЗ: ЛФ - % соотношение различных видов клеток, полисегментированные найтрофилы (сегментов до 10 - 12) при N до 5.,
В Er - т. Жолли, кольца Кебота, базофильная зернистость, сдвиг в лево или право, обнаружение мегалобластов - это крупные клетки красного ряда со своеобразной структурой хроматина ядра и цитоплазмы и др. аномалии.
Определение количества ретикулоцитов, виды ретикулоцитов, состояния, характеризующиеся увеличением и снижением их количества
Ретикулоциты - выявление зернисто - сетчатой субстанции Er, сохранившие остатки ретикулума (РНК при окраске щелочными красками с дальнейшим обнаружением их в мазке крови (азуром)
N – 0,5 - 1 %.
Увеличение количества – активация кроветворения в костном мозге (при о. кровопотерях и гемолитических анемиях)
Уменьшение кол - ва – снижение кроветворения в костном мозге (при гипоплпстических и апластических анемиях, анемиях с дефецитом Fe, витамина В12 или фолиевой кислоты, а так же при приеме цитостатиков и лучевой болезни).
Скорость Оседания Эритроцитов, методика постановки и влияющие факторы
СОЭ - м - д Панченкова в N – жен. 2 - 15 мм/ч;
муж. 1 - 10 мм/ч.
Повышенное СОЭ – инф.бол., восп.заб., септические и гнойные процессы, анемии, лейкозы, злокачеств. опухоли, коллагенозы (ревматизм), забол. печени и почек, сахарном диабете, тиреотоксикозах, миеломной болезни.
Понижение СОЭ – эритремия, ожоги, холера, врождённые пороки сердца, серповидно - клеточная анемия, вторичные эритроцитозы.
Автоматические методы анализа клеток крови
Использ. различные автоматические гематологические анализаторы. Делятся на разные классы:
I класс – 8 - 10 параметров, без дифференц. L;
II класс - до 20 парам.,красн. крови и тромбоц., отр. по обьему L, Er, Tr; частичн.дифференц. L (Моноц., Эозиноф., Базофилов)
III класс - высокотехн. гемат. анал. с полной дефф. по 5 призн + полный разверн. ан. кр.
IV класс - тоже самое что 3 + дифференциация субпопуляций.
Определение группы крови и резус – фактора, характеристика антигенов и антител системы АВО
Группы крови: I (O) - a b
II (A) - b, нет a
III (B) - a, нет b
VI (AB) - нет ab
Определение с цоликлонами анти - А и анти - В.
Определение резус - фактора экспресс методом в пробирках без подогрева с универсальным реагентом антирезус.
2.определение резус принадлежности человека цоликлоном анти - D - супер.
Принцип – агглютинация – склеивание Er.
Определение общего белка в сыворотке крови, гипо и гиперпротеинонемии, клинико-диагностическое значение
Белки – высокомолекул. органич. азотосодержащие биополимеры, сост. в основн. из аминокистот и наход. в кл.
в коллоидном сост.
Белки выполняют функции:
наследственная (нуклепропеиды – участвуют в передаче наследственности),
транспортная (участвуют в переносе пит. веществ и удалении конечных продуктов),
регуляторная (поддерживает онкотическое давление, КЩС),
защитная (выработка иммунных белков – антител, ответ на действие микроорганизмов),
каталитическая (ускорение реакций),
структурная (входят в состав всех клеток и тканей, 1/5 часть тела).
Белки делятся:
простые – при гидролизе состоят из аминокислот
сложные – состоят из белковой части и не белковой – простетической.
Определение общего белка проводят биуретовым методом.
Норма белка в 65 - 85 грамм/л
Электрофорез белков – принцип – в электростатическом поле Б. движутся по смоченной буфероным рас - ром хроматографической бумаге, ацеталцеллюлитной пленке, крахмаловому, агаровому гелям со скоростью. завис. от величины электрического заряда и молекулярной массы частиц.
На автоматическом анализаторе «HITASHI»
КДЗ – комплексная оценка изменений всех выделяемых на носителе белк.фракций.
Диспротеинемия – наруш.соотношения между разл. Б.фракц.
Паропротеинемия – появл в плазме крови патологических,
не встреч в норме Б. - парапротеинов.
Исследование белкового спектра крови, электрофорез белков сыворотки крови. Типы протеинограмм
Белки – высокомолекул. органич. азотосодержащие биополимеры, сост. в основн. из аминокистот и наход. в кл. в коллоидном сост.
Делятся:
Простые - сост.только из аминокислот (альбумин,эластин, протамин,гистоны, коллаген)
Сложные – сод.в себе белковую часть и небелковые компоненты, (нуклеопротеиды, хромопр., гликопротеиды, липопротеиды, металопротеиды)
Определ. общ. белка - биуретовым методом (Кингслея - Вейксельбаума)
Сниж. - гипопротеинемия (сниж.синтез, с потерей бела, с повыш.распад.б.)
Повыш. - гиперпротеинемия (при миеломн.б., хр.инф., аутоиммун.заб, обезвож.организма)
Электрофорез белков – принцип – в электростатическом поле Б.движутся по смоченной буфероным рас - ром хроматографической бумаге, ацеталцеллюлитной пленке, крахмаловому, агаровому гелям со скоростьюя. Завис.от величины электрического заряда и молекулярной массы частиц.
Б. разделяются на 5 основных фракций: альбумин и 4 глобулиновые: а1 - , а2 - ,B - , у – глобулины, содержание котор. опред фотометрически или с использованием денситометрии.
КДЗ – исследования Б.Ф. - комплексная оценка изменений всех выделяемых на носителе белк.фракций.
Типы измен.:
- о. в. Процессы - Альбумин знач.сниж., увелич к - во: а1 - ,а2 - глобулиов.
- хр. в. проц. - общ. Б. не измен., альбумин умеренно сниж., увелич. а1 - , а2 - , B - , у – глобулины.
- синдром сниж. почечн. функции - знач. сниж. Альбумина, умеренно сниж. а2 - ,B - глобулины. (за счет сниж. ЛПОНП), при умер. сниж. у – глобулинов (G и А) – вследствии повыш. проницаемости почечного фильтра).
- злок.новообразования – резкое знач. сниж. Альбумина и значит. Увелич. всех глобул. фракц.
- гепатиты - (в следствии токсического поврежден.печени) и т.д.
Клинико-диагностическое значение исследования содержания мочевины, методы определения
Мочевина предст. собой диамид уголоной кислоты, образ. в печени в процессе обезвреж. аммиака. М. свободно проходит через мембраны клеток паренх. орг. и Er.
Абсолютная гиперазотемия - Повыш.содержание мочевины вызывается усиленным образованием компонентов остаточного азота (активация протеолиза и катаболизма белка), либо задержкой азотистых шлаков при наруш. выделит. функции почек при их патологии: хр. почечн. недост., о.и хр. гломерулонефрит, пиелонефрит, амилоидоз, поликистоз и др., при уменьшении фильтрации в клубочках почек из - за ухудшения центральной гемодинамики (у больных с декомпенсацией сердечно - сосудистой деятельности).
Внепочечная задержка гиперазотемия – при наруш. оттока мочи (камни мочевывод. путей, сдавл. опухолью, аденома и гепертрофия предст.жел.)
Метаболическая (продукционная) гиперазотемия – при усил. распаде белков (патологич. состояния, при инфекц. заб. протек. с лихорадкой и прогрессирующем распадом тканей – сепсис - дефтерия – скарлатина - круп. пневмония – туберкулез); сах. диабете, злок. новообразов., о. атроф. и тяж. цирозах печени, ожогах, перитонитах,
о. киш. непрох., гиперфункции коры надпочечников, о. инф. миокарда, отравл. ядами (мышьяком, фосфором, щелочами и др.)
Относительная азотемия - у больн. с явлениями сгущения крови при профузных поносах, усиленном потоотделении.
Методы определения сод. Мочевины – на 2 осн. группы:
Ферментативные (уреазные) и неферментативные (газомтрические или гипобромные, ксантигидроловые, диацетилмонооксимные, гипохлоридные)
Полуколичественные – диагност. Тест - полоски.
Колориметрический методы – осн. на реакц. Фирона, сост.в образ. окраш. прод. при взаимодейств. Мочевины и диацетилмонооксимом.
N в сыв.крови. - 2.5 - 8.3 ммоль/л; в сут.моче – 330,0 – 582,8 ммоль/л.
Более точными и специфич. явл. ферментативные методы.
- с прим.препар.уреазы.
Опр.мочев. - уреазным фенолгипохлоридным методом:
М. под действ. уреазы гидролизируется с обр. карбоната аммония, ионы аммония в присутствии нитропрусида с фенолом и гипохлоритом - образ. окраш. комплекс. интенсивн. окр. = конценрации мочевины.
N в сыв.крови. - 1.7 - 8.3 ммоль/л (100 - 500мг/л);
в сут. моче – 333 – 583 ммоль/л. (20 - 35 г/сут.)
Определение креатинина, геморенальные пробы, клиническое значение
Опред. креатинина:
неферментативн. (колориметрические и кинетические –
реакция образования окраш. комплекса с пикриновой кислотой).
энзиматические
кинетический метод - реакция Яффе. (СОЛАР)
У мужчин - 53 – 110 ммоль/л
У женщ. - 44 – 95 ммоль/л
КДЗ – увелич. Ретанционное – наруш. почек любого происхождения
снижение.
Увеличение продукционное – при кишечн. непроход., о. атроф. печени, пневмонии, лихорад.сост.
Снижение – уменьшение массы тела - мышечн.дистрофия, атрофии, параличи, парезы и др.
Для диагностики – расчет клиренса креатинина (геморенальная проба или клиренс теста):
Метод основан расчет очистительной способности почек – клиренса (чистить) - Коэффициент очищения. Сравнение содержания в - в в крови и в моче.
Повышение концентрации азота и его компонентов в крови свидетельствует о задержке азотистых «шлаков» в следствии нарушения почечного фильтра.
Клинико–диагностическое значение определения ферментов. Методы исследования
Ферменты (Энзимы) – спец. белки, роль – биокатализаторов (ускорителей хим. реакций) делятся на - простые (сост.только их аминокислот); - сложные – двукомпонентные – белковый компонент + апофермент, простетическая группа + кофермент – таких ферментов большинство. К этой группе относятся – трансаминазы, ЛДГ, ПДГ, транскетолазу.К простетической гр. в молекуле энзима (фермента) + витамины, нуклеотиды, углеводы, некатор. металлы, ост. фосфорн. кислоты и др. соединения.
Ингибиторы – подавляют ферментативную реакцию.
Активаторы – повыш.скорость ферм.реакций.(Са+, Мg+, К+, Na+,
Сl - (анион) и др.)
В печени содерж. - АЛТ, АСТ, ЛДГ, ЛАП, ЩФ;
В сердце – КК, ЛДГ, АСТ;
В поджелуд. жел. – а – амилаза (диастаза), липаза, ЛДГ;
В костной ткани – ЩФ;
В предстательной жел. – КФ
Методы исслед.:
1.Колориметрические – инкубац.сывор.с субстрактом в буфере, опред.время, реакцию останавливают и образующие продукты при помощи химической реакции определяют, либо замеряют количество оставшегося субстракта.
Страницы: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7
