Крайне высокие показатели постнеонатальной смертности отмечены в Приуральском (27,8), Тазовском (18,5), Шурышкарском (14,0), Ямальском (21,9%) районах, где значителен удельный вес детей коренной национальности. Показатели младенческой и перинатальной смертности в 1994 г. в указанных районах превышали в 1,5 - 3 раза аналогичные показатели в Российской Федерации, состовлявшие 18,6 - 17,1 на 1000 родившихся.
В структуре причин младенческой смертности среди коренного населения на первом месте стоят болезни органов дыхания, на втором - несчастные случаи, на третьем - болезни новорожденных. Ситуация обусловлена рядом обстоятельств: суровый климат, труднодоступность медицинской помощи, поздняя обращаемость за медицинской помощью, отсутствие рации в ряде бригад оленеводов и охотников,недостаточная обеспеченность транспортом, неполная укомплектованность квалифицированными медицинскими кадрами. Следует отметить, что врожденные аномалии среди новорожденных как пришлого, так и коренного населения особенно часто наблюдались в городах Салехарде, Новом Уренгое, Надымском районе.
Значительный удельный вес в структуре патологии перинатального периода занимали внутриутробные гипотрофии, физиологическая незрелость. Увеличение числа маловесных детей указывает на ряд причин, связанных с патологией матерей, а также с воздействием неблагоприятных факторов внешней Среды.
Высокой остается смертность детей, особенно в возрасте до одного года, проживающих в тундре. В структуре причин смерти отмечаются несчастные случаи, заболевания органов дыхания, инфекционные и паразитарные болезни (Мефодьев, 1998).
II. материалы и методы исследований
2.1. Материалы исследований
Все новорожденные были разделены на три группы: новорожденные с ГА по АВО-системе, новорожденные с ГА по Rh-фактору и новорожденные с ГА по АВО- системе и Rh-фактору одновременно.
В первую группу вошло 20 детей, во вторую - 69 детей, в третью - 27 детей.
Кроме того, новорожденные второй группы были разделены на две подгруппы по типу применяемого лечения: в первую группу вошли дети, пролеченные оперативным путем (n = 30), во вторую группу - пролеченные консервативным путем (n = 39).
Так же, было проанализировано течение заболевания у детей рожденных от матерей, приехавших с юга и севера Тюменской области.
У больных детей брали кровь для исследования тяжести течения ГА при рождении, в пик заболевания и при выписке из стационара.
Нами были исследованы следующие показатели крови: 1. Определение количества Нb; 2. Определение общего объема эритроцитов (Ht); 3. Определение количества эритроцитов; 4. Определение количества общего билирубина; 5. Определение количества прямого билирубина; 6. Определение количества непрямого билирубина.
2.2. Определение количества гемоглобина
Унифицированный гемоглобинцианидный метод (1974). Гемоглобин окисляют в метгемоглобин железосинеродистым калием (красная кровавая соль); образующийся с ацетонциангидрином окрашенный цианметгемоглобин (гемиглобинцианид) определяют колориметром. Реактивы: 1. Трансформирующий раствор; 2. Калибровочный раствор гемиглобинцианида. Можно использовать стандартный раствор фирмы “Имуна” с концентрацией гемиглобинцианида 61,23 мг / 100 мл и фирмы “Реанал” с концентрацией вещества 59,75 мг / 100 мл. Это соответствует концентрации гемоглобина в крови 15,4 г / 100 мл и 15 г / 100 мл при разведении ее в 251 раз. Стандартные растворы хранят в холодильнике (в незамороженном виде) в защищенном от света месте (Кост, 1975).
Специальное оборудование: фотоэлектроколориметр (ФЭК - 56 М). В пробирку к 5 мл трансформирующего раствора добавляют 0,02 мл крови (разведение в 251 раз). Содержимое пробирки тщательно перемешивают и оставляют стоять на 10 мин. Измеряют на фотоэлектроколориметре при длине волны 500-560 нм (зеленый светофильтр) в кювете с толщиной слоя 1 см против холостой пробы (трансформирующий раствор). Измеряют при тех же условиях стандартный раствор.
Расчет содержания гемоглобина производят по калибровочному графику, построенному по стандартному раствору гемоглобинцианида, или по формуле:
Hb (г %) = Еопт ( С ( К ( 0,001, где
Ест
Еопт - зкстинкция опытной пробы; Ест - экстинкция стандартного раствора; С - концентрация гемиглобинцианида в стандартном растворе, мг %; К - коэффициент разведения крови; 0,001 - коэффициент для подсчета мг / 100 мл в г / 100 мл.
2.3. Определение общего объема эритроцитов (гематокрита)
Определение гематокрита с помощью микроцентрифуги (1979). Принцип. Центрифугирование крови определенное время при постоянном числе оборотов центрифуги с последующим определением результата по специальной шкале.
Реактивы. Антикоагулянты: гепарин - 5000 ЕД/мл разводят дистиллированной водой в соотношении 1 : 5 или этилендиаминтетрауксусной кислоты динатревая соль (ЭДТА Na2, трилон Б), 40 г / л.
Оборудование: 1. Микроцентрифуга МЦГ - 8; 2. Капиллярные трубки (в комплекте с центрифугой). Можно использовать капиляры для определения С - реактивного белка.
Ход определения. Предварительно обработанный антикоагулянтом и высушенный капилляр заполняют кровью из пальца на 7/ 8 длины. Укупоривают капилляр с одного конца специальной пастой. Помещают в ротор центрифуги так, чтобы укупоренные концы упирались в резиновую прокладку, и центрифугируют 5 мин при 8000 об /мин. По отсчетной шкале, приложенной к центрифуге МЦГ - 8, определяют гематокритную величину.
2.4. Определение количества эритроцитов
Унифицированный метод подсчета в счетной камере (1972). Принцип. Подсчет эритроцитов под микроскопом в определенном количистве квадратов счетной сетки и пересчет на 1 мл крови, исходя из объема квадратов и разведения крови.
Реактивы. 0,9 % раствор хлорида натрия или раствор Гайема. Специальное оборудование:
1. Счетная камера Горяева;
2. Микроскоп.
Разводят исследуемую кровь в 200 раз. Для этого в сухую пробирку отмеривают 4 мл реактива 1 или 2. Пипеткой набирают 0,02 мл крови. Кончик пипетки вытирают фильтровальной бумагой или марлей и кровь выдувают на дно пробирки, пипетку тщательно промывают в верхнем слое жидкости, повторно набирая ее и выдувая в пробирку, содержимое пробирки перемешивают и оставляют стоять до момента счета.
Подготавливают счетную камеру: протирают насухо камеру с сеткой и покровное стекло, затем покровное стекло притирают к камере, слегка надавливая на стекло таким образом, чтобы по краям его появились радужные полосы (это свидетельствует о требуемой высоте камеры - 0,1 мм).
Заполняют счетную камеру разведенной кровью: предварительно несколько раз тщательно встряхивают содержимое пробирки, затем стеклянной палочкой отбирают каплю разведенной крови и подносят ее к краю покровного стекла, следя за тем, чтобы она равномерно без пузырьков воздуха заполнила всю поверхность камеры с сеткой, не затекая в бороздки. Заполненую камеру оставляют в горизонтальном положении 1 мин (для оседания эритроцитов).
Для подсчета эритроцитов, не меняя горизонтального положения камеры, помещают ее на столик микроскопа (объектив 8 х, окуляр 10 х) находят верхний левый край сетки. Счет производят в 5 больших квадратах, разделенных на 16 малых, т. е. в 80 малых квадратах.
Рекомендуется считать клетки в квадратах сетки, расположенных по диагонали. Для того чтобы одни и те же эритроциты, лежащие на линиях, не попали дважды в счет, принято для каждого квадрата считать расположенные на определенных двух линиях.
Расчет количества эритроцитов в 1 мкл крови производят, исходя из разведения крови (200), числа сосчитанных квадратов (80) и объема 1 малого квадрата ( 1 мкл), по следующей формуле:
4000
Х = а ( 4000 ( 200 , где
80
Х - число эритроцитов в 1 мкл крови; а - число сосчитанных эритроцитов.
В результате сокращения Х = а ( 10000 (Меньшиков, 1987).
2.5. Определение общего билирубина
Метод Ендрасика - Грофа (1972). Принцип. Под воздействием HCI разрывается тетрапироловая связь билирубина и образуются два дипиррола, которые диазотируются диазобензосульфоновой кислотой с образованием розового-фиолетового азобилирубина. Связанный билирубин реагирует быстро, несвязанный билирубин реагирует после добавления кофеинового реактива.
Реактивы: 1. Кофеиновый реактив 1,75 мл;
2. Диазосмесь 0,25 мл;
3. Сыворотка 0,5 мл.
В две пробирки (одна опытная и одна холостая) вводят сыворотку и реактивы. Для холостой пробы требуется: 0,5 мл сыворотки, 1,75 мл кофеинового реактива и 0,25 мл раствора хлорида натрия. Для определения общего билирубина пробу оставляют стоять 20 мин, после чего измеряют на фотометре. При дальнейшем стоянии краска не изменяется. Измерение проводят при длине волны 500-560 нм в кювете с толщиной слоя 0,5 см против воды. Из показателя общего билирубина вычитают показатель холостой пробы. Расчет производят по калибровочному графику.
Построение калибровочного графика. Калибровочный график строится по готовому набору реактивов “Билирубин-эталон” (“Лахема”). Набор Био-Ла-Тест “Билирубин-эталон” включает:
1.Билирубин лиофилизированный;
2. Альбумин лиофилизированный;
3. Калибровочная линейка до 170 мкмоль/л.
2.6. Определение прямого билирубина
Реактивы: 1. Сыворотка 0,5 мл;
2. Раствор хлорида натрия 1,75 мл;
3. Диазосмесь 0,25 мл.
В две пробирки (одна опытная и одна холостая) вводят реактивы. Для определения связанного билирубина измерение проводят спустя 5-10 мин после добавления диазосмеси, так как при длительном стоянии в реакцию вступает несвязанный билирубин.
Измерение проводят при длине волны 500 - 560 нм в кювете с толщиной слоя 0,5 см против воды. Из показателей, полученных при измерении связанного билирубина, вычитают показатель холостой пробы. Расчет производят по калибровочному графику.
2.7. Определение непрямого билирубина
В сыворотке крови на долю непрямого билирубина приходится 75%. Исходя из этого, находим НБ по формуле:
НБ = ОБ - ПБ.
2.8. Методы статистической обработки результатов
Полученные данные были обработаны статистически (Лакин, 1980). Применялся параметрический метод вариационной статистики.
1. Нахождение среднего арифметического значения членов совокупности (М) и среднего квадратичного оклонения (m) велось по формуле:
М = ( ; ( = ( ( ( ( a2 n n - 1 ,
где ( - сумма вариант; n - число вариант;
( - среднее квадратичное отклонение.
2. Определение m - средней квадратичной ошибки:
m = ( (
( n
3. Определение критерия достоверности (t) велось по Стьюденту:
t = М1 - М2
( m12 + m22
III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Сравнительная характеристика показателей периферической крови у новорожденных с ГА по АВО-системе, пролеченных консервативным путем
Как видно из таблицы 1, при ГА новорожденных по АВО-системе, среднее количество эритроцитов и ПБ существенно не изменялось до и после лечения и составляли: эритроциты 4,4 ( 0,16 ( 1012 л и 4,3 ( 0,12 ( 1012 л, ПБ 14,19 ( 4,68 ( 1012 л и 9,00 ( 2,40 ( 1012 л. В пик заболевания повышение ПБ не наблюдалось.
При консервативном лечении новорожденных с ГА по АВО-системе происходило стабильное достоверное (р
Страницы: 1, 2, 3, 4, 5