Некоторые аминокислоты синтезируют из предшественников, полученных химически и модифицированных ферментной системой организма (триптофан получают из антраниловой кислоты).
II. Производство витаминов
В настоящее время микробиологически синтезируют лишь особо сложные по строению витамины (В2, В12, ?-каротин, D). Остальные либо синтезируют химическим путем, либо выделяют из природных источников.
Витамин В2 (рибофлавин) вплоть до 30-х годов 20 века выделяли из природного сырья (1г из 1т моркови и 6г из 1т печени трески). В 1935 году был обнаружен активный продуцент рибофлавина - гриб Eremothecium, способный давать с 1т питательной среды 25 кг витамина. Отбор мутантов ведут по устойчивости к аналогу витамина В2.
Витамина В12 из 1т печени трески можно было выделить лишь 15 мг. В настоящее время витамин В12 синтезируется только микробиологическим путем с использованием актиномицетов и одноклеточных водорослей.
?-каротин можно выделить из ряда растительных объектов: 1т моркови содержит 0,06 мг витамина, в то время как биомасса гриба Blaneslea накапливает ?-каротин в количестве 8 мг/г.
III. Получение органических кислот
Объем мирового производства лимонной кислоты НООССН2С(ОН) (СООН) СН2СООН - 400 тыс. т/год. Данное производство относится к старейшим микробиологическим процессам: 1893 г. - год основания. Используют культуру гриба Aspergillus niger. Условиями высокого выхода лимонной кислоты является хорошая аэрация и дефицит фосфата в среде.
Одновременно с лимонной было налажено аналогичное производство молочной кислоты при участии молочнокислых бактерий Lactobacillus.
IV. Получение антибиотиков
Вспомните, что такое антибиотики? Думаю, важность получения соединений данной группы нет необходимости доказывать.
В 1940 году было известно всего 6 антибиотиков, а в настоящее время описано свыше 12 000 соединений, из которых в клинике используется около 200 (остальные токсичны).
Биосинтез антибиотиков осуществляется:
1) добавлением в питательную среду подходящего предшественника (фенилуксусная кислота стимулирует биосинтез бензилпенициллина);
2) использованием блокированных мутантов, у которых отсутствует определенное звено в цепи реакций, ведущих к синтезу антибиотика. Следовательно, можно получить аналоги антибиотиков и модифицировать их химически (бензилпенициллин, ампицилин).
4. Вывод
Пока человек лишь приближается к моделированию природных биохимических процессов, а пока изыскивает новые пути использования существующих.
УРОК №6 по теме «Применение ферментов»
Задачи:
1. Образовательная: знакомство с иммобилизованными ферментами. Промышленное применение иммобилизованных ферментов.
2. Развивающая: а) развитие познавательного интереса;
б) формирование логического мышления в ходе знакомства с методами иммобилизации ферментов;
в) формирование умений и навыков умственного и практического труда.
3. Воспитательная: а) в целях формирования диалектического мировоззрения показать использование катализаторов белковой природы;
б) воспитание мотивации к обучению при акцентировании на современности и важности данной методики работы с ферментными препаратами.
Ход урока:
1. Организация класса
Какими способами можно получить белковые аминокислоты? Попытайтесь написать реакцию гидролиза белка в общем виде.
2. Актуализация знаний
Всем хорошо известно, что в морской воде много растворенного кислорода, но, тем не менее, его использование затруднено, и при погружении приходится использовать дополнительные источники кислорода. А что, если гемоглобин, выделенный из крови, использовать в качестве посредника между морской водой и газовой средой дыхательного аппарата?! Более того, модель «гемогубки» уже предложена и, возможно, в ближайшем будущем будут сконструированы эффективные искусственные жабры. Сегодня на уроке мы попытаемся разобраться, каким образом можно «направить в нужное русло» тот или иной фермент.
3. Изучение нового материала
Ферменты сохраняют свои уникальные свойства (какие?) и вне клеток, поэтому их традиционно широко применяют в практике.
Применение ферментов
Фермент
Химико-биологический процесс
Область применения
Амилазы
Гидролиз крахмала до мальтозы и глюкозы
Спиртовая промышленность, хлебопечение, получение глюкозы
Глюкоизомераза
Глюкоза фруктоза
Кондитерская промышленность
Липазы
Гидролиз жиров и масел
Пищевая и медицинская промышленность
Пептидогидролазы
Гидролиз белка
Получение аминокислот, производство сыра, выделка кожи, медицина
Целлюлазы
Гидролиз целлюлозы до глюкозы
Производство этанола, глюкозо-фруктозных сиропов
Сахараза
Гидролиз сахарозы
Сиропопроизводство
Но если смешать фермент с реагентами, то после окончания реакции его будет очень трудно отделить от продуктов. Еще в 1916 году Дж. Нельсон и Е. Гриффин показали, что сахараза, сорбированная на угле, сохраняла свою каталитическую активность, а уголь можно отделить от раствора продуктов без особых затруднений, и, следовательно, фермент можно применять многократно.
В настоящее время (с 1971 года) применяется термин «иммобилизация» - полное или частичное ограничение движения белковых молекул. Иммобилизованными ферментами называют ферменты, искусственно связанные с нерастворимым носителем, но сохраняющие свои каталитические свойства (под запись). Иммобилизованный ферментный препарат включает в себя непосредственно фермент и носитель (природные полимеры - целлюлоза, хитин, желатин; синтетические - полистирол, поливиниловый спирт; неорганические - керамика, силикагель, графит).
Примеры химической иммобилизации:
1) образование амидной связи:
H - C(O) Cl + H2N - Ф = H - C(O) NHФ + HCl
2) образование дисульфидного мостика:
H - SH + 0,5O2 +HS - Ф = H - S - S - Ф +Н2О
3) образование оснований Шиффа:
H - C(O) H + H2N - Ф = H - CH = N - Ф + Н2О
Промышленное применение иммобилизованных ферментов:
1. Иммобилизованная сахараза работает до 10 лет, при этом активность фермента теряется незначительно:
С12Н22О11 + Н2О = С6Н12О6 + С6Н12О6
глюкоза фруктоза
инвертный сахар
2. Глюкоизомераза превращает глюкозу во фруктозу и таким образом получают глюкозо-фруктозный сироп (50 х 50).
3. Осуществлен промышленный синтез аминокислот из их аналогов на иммобилизованных ферментах:
НООС - СН = СН - СООNH4 HOOC - CH2 - CH(NH2) - COOH
фумарат аммония аспарагиновая кислота
HOOC - CH2 - CH(NH2) - COOH H3C - CH(NH2) - COOH + CO2
аспарагиновая кислота аланин
4. Яблочную кислоту - заменитель лимонной в продуктах питания - получают из химически синтезируемой фумаровой:
НООС - СН = CH - СООН + Н2О НООС - СН(ОН) - СН2СООН
фумаровая кислота яблочная кислота
4. Заключение
Итак, нам стало ясно, какое значение играют ферменты в современной химической промышленности. На следующем уроке мы попробуем сами получить иммобилизованный ферментный препарат.
УРОК №7 Практическая работа «Приготовление иммобилизованных ферментных препаратов»
1. Образовательная: освоение простейших методов получения ферментных препаратов в растворенном и иммобилизованном виде.
2. Развивающая: а) развитие познавательного интереса учащихся;
б) формирование логического мышления в ходе выполнения практической работы;
3. Воспитательная: а) в целях формирования диалектического мировоззрения проведением качественных проб на ферменты показать реальность процесса иммобилизации;
б) воспитание мотивации к обучению.
Какие способы иммобилизации ферментов вы знаете?
2. Постановка учебных задач
На сегодняшнем занятии вы попробуете самостоятельно выделить фермент из природного объекта и иммобилизовать его на полимерном носителе.
Класс делится на 3 группы, и каждая работает со своим ферментом.
3. Проведение работы (более подробно см. [13].
I. Получение ферментных препаратов:
10 г. природного объекта (пекарские дрожжи - сахараза; бобы фасоли без кожуры - уреаза; проростки пшеницы - комплекс амилаз) тщательно растирается в ступке с кварцевым песком и заливается 20-30 мл воды; перемешивание - 10 мин. Фильтрование через складчатый фильтр.
II. Иммобилизация:
После пояснения термина «катионит» берут 1 г его и в химическом стакане перемешивают с полученным ранее фильтратом 40-60 мин. После фильтрования (обычный фильтр) массу промывают 2 раза водой.
III. Проведение качественных проб:
(Заранее на доске приготовлена таблица)
Субстрат
Реагент обнаружения
Признаки реакции
3 мл 5% сахарозы
Фелингова жидкость (2 мл)
Образование красного Cu2O при нагревании
Уреаза
5 мл 1% мочевины
2 капли спиртового фенолфталеина
Малиновая окраска
5 мл 1% крахмала
Страницы: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15