Фагоцитарную активность нейтрофилов оценивали по показателю процент фагоцитоза (ПФ), изучая относительное количество нейтрофилов, проявивших фагоцитарную активность. Кровь мышей смешивали с двухмиллиардной взвесью Staphylococcus epidermidis в соотношении 1: 10 и инкубировали при 37° по Цельсию в течение 30 минут. После инкубации готовили кровяной мазок на предметном стекле. Мазок окрашивают по Романовскому-Гимзе. Учет результатов осуществлялся микроскопически. В мазке при увеличении 90 с иммерсионной системой подсчитывали процент фагоцитирующих нейтрофилов (показатель фагоцитоза - ПФ). Интенсивность фагоцитоза определяли на основании фагоцитарного индекса (ФИ) - количества объектов фагоцитоза, захваченных одним фагоцитом из ста фагоцитов пробы.
Анализ полученных результатов выполнен с использованием статистической программы "BIOSTATISTICA" Version 4.03 by Stanton A. Glantz (перевод на русский язык©1998 "Практика"). Различия между группами исследованы с помощью t-критерия Стьюдента, с расчетом 95% доверительного интервала для разности средних величин. Уровень статистической значимости был принят p<0,05. Данные представлены в виде M±m.
На начальном этапе исследования было проведено изучение острой токсичности настойки гастродии при внутрижелудочном введении. Проведенные первоначально исследования на токсичность настойки гастродии 70%, показали, что препарат не только относится к малоопасными веществам, но и снижает токсичность этанола не менее чем на 27% (таблица 1).
Таблица 1
Острая токсичность 70% настойки гастродии при внутрижелудочном введении
Продукт
Доза исследуемого продукта в мл
ДМТ
DL16
DL50
DL84
DL100
Контроль (раствор 70% этанола)
10,0
16,3
22,5±4,1
27,1
30
70% настойка гастродии
15,0
21,8
28,6±3,9
34,3
40
ДМТ - доза минимальной токсичности (гибели животных не наблюдается)
DL16, DL50, DL84, DL100 - дозы, при которых наблюдается гибель 16, 50, 84 и 100% животных
Показателем сопротивляемости животных к воздействию гипоксии являлась продолжительность их жизни. Продолжительность жизни крыс в контрольной группе составила 71.2±4.2 минуты, а при использовании настойки гастродии в концентрации 70% - 91.0±4.6минут. Таким образом, при применении 70% настойки гастродии отмечалось достоверное повышение устойчивости к гипоксии подопытных животных в 1.31 раза по сравнению с контролем (таблица 2).
Актопротекторная активность оценивалась по времени плавания крыс с грузом в 10% от веса животного в воде при температуре 320С до полного утомления. Время плавания крыс в контрольной группе (таблица 2) составило 15,2±3,9 минут, а при использовании настойки гастродии - 38,0±4,26 минут, то есть она достоверно повышалась в 2,5 раза. .
Таблица 2
Антигипоксическая и актропротективная активность настойки гастродии
Группы
Гипоксия: продолжительность жизни в мин
Плавание: продолжительность в мин
Контроль
71,2±4,2
15,2±3,9
91,0±4,6*
38,0±4,3*
* - достоверная разница с контролем (р<0.05)
Изучение действия настойки гастродии на модели иммобилизационного стресса у крыс показало, что ее введение препятствует стрессорной инволюции тимуса, достоверно увеличивая его весовой коэффициент по сравнению с контролем на 32% (таблица 3).
Таблица 3
Стресспротективная активность настойки гастродии
Исследуемые показатели
весовой
коэффициент
Поражение слизистой
желудка
тимус
надпочечники
Степень
изъязвления
% крыс с язвами
Паурса
Интактные
0,60±0,04
0,083±0,006
-
0,45±0,01*
0,096±0,008
5,5±1,1*
100
5,5
Гастродия
0,58±0,02**
0,089±0,005
2,0±0,6**
50
1,0
* - достоверная разница с интактными (р<0.05)
** - достоверная разница с контролем (р<0.05)
Также исследуемый препарат активно препятствовал и гипертрофии надпочечников. Особое внимание на себя обращает гастропротективное (защита слизистой желудка от неблагоприятных воздействий) действие настойки гастродии при стрессе. Она не только снижало количество стрессорных язв у подопытных животных, но и в половине случаев препятствовала их образовании. Это свидетельствует о высокой гастропротективной активности гастродии при стрессе и позволяет предположить наличие у препарата противоязвенной активности.
При изучении поведенческих реакций по методике "открытое поле" обнаружено, что настойка гастродии повышала вертикальную компоненту двигательной активности в 1.75 раза, величина же горизонтальной компоненты оставалась практически неизменной. Это свидетельствует о том, что гастродия повышает, прежде всего, активность познавательной компоненты двигательной реакции. Одновременно с этим нарастает в 2,2 раза и эмоциональную активность крыс (рисунок 1).
Рисунок 1. Нейрогенная активность настойки гастродии по методике "открытое поле"
ДА - двигательная активность.
Эмоц. акт. - эмоциональная активность.
Иммуномодулирующая активность гастродии исследовалась в отношении гуморальных и клеточных параметров неспецифического иммунитета. который обуславливает первичную резистентность к инфекционным заболеваниям. В качестве параметра, оценивающего клеточный иммунитет, исследовалась фагоцитарная активность нейтрофилов, а параметра, оценивающего гуморальный иммунитет - активность лизоцима. Как показало исследование, настойка гастродии 70% вызывала повышение фагоцитарной активности, как увеличивая число нейтрофилов (в 1,5 раза), принимающих участие в процессе фагоцитоза, так и несколько повышая (на 23%) интенсивность фагоцитоза. Еще более выражено гастродия влияла не гуморальное звено неспецифического иммунитета - уровень лизоцима крови возрастал в 1,9 раза. (таблица 5).
Таблица 5
Влияние настойки гастродии на показатели неспецифического иммунитета у белых мышей
Группа
Показатель фагоцитоза (ПФ)%
Фагоцитарный индекс (ФИ)
Лизоцимная активность, г/л.
3,0
2,80
60*
3,7
5,25*
1. Настойка Гастродии высокой относится к нетоксичным малоопасным веществам.
2. Гастродия высокая значительно повышает устойчивость к экспериментальной гипоксии и обладает актопротекторным действием.
3. Отмечено антистрессорное и особенно значительное противоязвенное действие Гастродии высокой.
4. Гастродия высокая обладает нейротропной активностью, повышая, прежде всего, познавательную и эмоциональную активность крыс.
5. Настойка Гастродии высокой характеризуется иммуномодулирующим действием, что проявляется повышением фагоцитарной активности, усилением гуморального звена неспецифического иммунитета.
Проведенный анализ спектра биологической активности настойки Гастродии высокой, продемонстрировал ее разноплановый характер действия при различных моделях патологии, воспроизведенных на белых беспородных крысах и белых мышах. Подобное множественное или плеотропное нормализующее действие характерно для лекарственных препаратов из группы алдаптогенов: женьшеня, аралии маньчжурской, заманихи высокой, элеутерококка колючего, радиола розовой, лимонника китайского и др.
Таким образом, благодаря уникальному химическому составу Гастродии высокой, данное растение может быть отнесено к группе адаптогенов, что делает ее перспективной для дальнейшего исследования с целью создания нового лекарственного препарата, обладающего адаптогенными свойствами.
1. Абдурахманов Т.М., Омаров Ш.М., Агаева Э.Н., Гаджиева Р. М Сочетанное использование адаптогенов для повышения работоспособности. // Фундаментальные исследования как основа создания лекарственных средств: Тезисы докл. I Съезда Российского научного общества фармакологов. - Волгоград, 1995. - С.4.
2. Агаева Э.Н. Влияние комбинированного применения растительных адаптогенов и продуктов пчеловодства на физическую работоспособность спортсменов: Автореф. Дисс. … канд. - М., 1995. - 25 с.
3. Алексеева С.Н. Влияние адаптогенов на иммунную и кроветворную системы в условиях радиационного и цитостатического воздействия: Автореф. Дисс. … канд. - Новосибирск, 1996. - 16 с.
4. Альберт А. Избирательная токсичность. - М., 1989. - Т.1. - 400 с.
5. Бажанов Н.О. Избранные лекции по фармакотерапии. - Ярославль, 2005. - 300 с.
6. Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. - Л., 1963. - 153 с.
7. Самойлов Н.Н., Третьякова Е.Н., Кузьмин В.И. и др. Влияние новых производных 3 - оксипиридина на физическую работоспособность в экстремальных условиях // Фундаментальные исследования как основа создания лекарственных средств: Тезисы докл. I Съезда Российского научного общества фармакологов. - Волгоград, 1995. - С.369.
8. Сефулла Р.Д., Азизов А.П., Анкудинова И.П., Кондратьева И.И. Взаимосвязь антиоксидантной активности и физической работоспособности у спортсменов под влиянием комплексных адаптогенов растительного происхождения // Казанский мед. журн. - 1997. - N3. - С.183-185.
9. Сейфулла Р.Д., Бочарова Л.Г., Кондратьева И.И. и др. Действие адаптогенов растительного происхождения при экстремальных нагрузках // III Российский национальный конгресс "Человек и лекарство": Тез. докл. - М., 1996. - С.285.
10. Сейфула Р.Д., Борисова И.Г. Проблемы фармакологии антиоксидантов // Фармакол. и токсикол. - 1990. - N6. - C.3-10.
11. Семейкин А.В., СтаневскаяТ.Ю., Чермных Н.С., Сергеев П.В. Механизм тимолитического действия анаболических стероидов // Фармакол. и токсикол. - 1991. - N4. - C.37-38.
12. Waegeneer N., Chleide E., Mercier M. Study of the troubles indyced by hypoxia on memory, and of the piracetam potential protection against them // Belg. J. Zool. - 1990. - Vol.120. - P.67.
13. Wacker A. Uber die Interferon induzierende und immunstimulierende Wirkung von Eleutherococcus // Acta medica empifica. - 1983. - N6. - P.340-343.
14. Wacker A., Eilmes H. - G. Virushemmung mit eleuterokokk Fluid-Extract // Erfahrungsheilkunde. - 1978. - Vol.27. - P.346-351.
15. Wagner G., Carelli M.,Jarvis F. Pretreatment with ascorbic acid attenuated the neurotoxic effects of metamphetamine in rat // Res.commun. chem. Pathol. and Pharmacol. - 1985. - Vol.47. - P.221-228.
Страницы: 1, 2
